飼料添加劑 L-色氨酸 - L-色氨酸含量的測定

GB/T 25735-2010 飼料添加劑 L-色氨酸

范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料添加劑 L-色氨酸產(chǎn)品的要求、試驗方法、檢驗規(guī)則及標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸和貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于以微生物發(fā)酵生產(chǎn)的飼料添加劑 L-色氨酸。
分子式: C₁₁H₁₂N₂O₂
相對分子質(zhì)量: 204.23(按2007年相對原子質(zhì)量)
結(jié)構(gòu)式:


要求
性狀
白色至微黃色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無嗅或略有氣味，略溶于水，溶于熱乙醇和氫氧化鈉溶液。
鑒別
氨基酸定性鑒別
試樣的水溶液與茚三酮溶液反應(yīng)，溶液呈紅紫色。
色氨酸定性鑒別
按 GB/T 18246 測定，要求試樣溶液色氨酸色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同，且測定含量在98%±2%~98%±3%之內(nèi)。
比旋光度法
試樣的水溶液經(jīng)旋光儀測定，其測定值在-29.0°~-32.8°之間。
技術(shù)指標(biāo)
技術(shù)指標(biāo)應(yīng)符合表1規(guī)定。


試驗方法
除特殊說明外，所用試劑均為分析純，實驗用水符合 GB/T 6682 中三級用水規(guī)定，試劑和溶液的制備應(yīng)符合 GB/T 601、GB/T 602 和GB/T 603 的規(guī)定。

試劑和溶液
茚三酮溶液: 1g/L水溶液。
色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品: 色氨酸含量注99.0%。
色氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(100nmol/mL): 稱取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品0.0510g(至0.0001g)，加水溶解(加1滴10%氫氧化鈉溶液)并定容至50mL，取該溶液1mL，用水定容至50mL。
甲酸。
冰乙酸。
高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液: c(HClO₄)=0.1mol/L。
α-萘酚苯基甲醇指示劑: 2g/L冰乙酸溶液。

儀器和設(shè)備
除實驗室常用設(shè)備以外，還需要以下儀器和設(shè)備:
氨基酸分析儀。
電位滴定儀。
電極: 飽和甘汞電極及玻璃電極。
酸度計。

L-色氨酸含量的測定
測定方法
稱取0.25g(至0.0001g)干燥至恒重的試樣于干燥的100mL燒杯或錐形瓶中，加入3mL甲酸，待試樣*溶解后加入50mL冰乙酸，將電極插入溶液中，調(diào)節(jié)攪拌速度至溶液充分渦旋，按儀器說明書調(diào)整儀器參數(shù)，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行電位滴定，以電位值突變作為滴定終點。如選擇指示劑法，加入10滴α-萘酚苯基甲醇指示劑，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，試樣液由橙黃色變?yōu)辄S綠色即為滴定終點。
同時做空白試驗。

結(jié)果計算
L-色氨酸(C₁₁H₁₂N₂O₂)含量X 以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示，按式(1)計算:

式中:
V₁一一試樣消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升(mL)；
V₀一一空白試驗消耗高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升(mL)；
c  一一高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m 一一試樣質(zhì)量，單位為克(g)；
204.23一一L-色氨酸的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾(g/mol)。
平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。
重復(fù)性
同一分析者對同一試樣同時進(jìn)行兩次平行測定的結(jié)果相差應(yīng)不大于0.5%。


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