食品加工用氨基酸 - 含量的測定（電位滴定法）

T/CBFIA 04001-2019 食品加工用氨基酸

范圍
本標準規(guī)定了食品加工用氨基酸的氨基酸命名、分子式、相對分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式技術要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標志、包裝、運輸、貯存。
本標準適用于以生物質(zhì)為原料，經(jīng)生物發(fā)酵、酶法轉(zhuǎn)化或水解提取精制而成的食品加工用氨基酸。

氨基酸命名、分子式、相對分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式
本標準中，各品種氨基酸的命名、分子式、相對分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)式應符合表1中的規(guī)定。








技術要求
感官要求
白色或微黃色顆粒狀結(jié)品或粉末狀結(jié)晶。
理化要求
L-異亮氨酸
應符合表2要求。


L-纈氨酸
應符合表3要求。


L-亮氨酸
應符合表4要求。


L-苯丙氨酸
應符合表5要求。


L-蘇氨酸
應符合表6要求。


L-谷氨酸
應符合表7要求。


L-色氨酸
應符合表8要求。


L-酪氨酸
應符合表9要求。


L-脯氨酸
應符合表10要求。


L-精氨酸
應符合表11要求。


L-絲氨酸
應符合表12要求。


L-醋酸賴氨酸
應符合表13要求。


L-鹽酸精氨酸
應符合表14要求。


L-鹽酸半胱氨酸一水物
應符合表15要求。


L-鹽酸鳥氨酸
應符合表16要求。


L-甲硫氨酸
應符合表17要求。


L-組氨酸。
應符合表18要求。


L-丙氨酸
應符合表19要求。


L-門冬酰胺一水物
應符合表20要求。


L-谷氨酰胺
應符合表21要求。


L-鹽酸組氨酸一水物
應符合表22要求。


L-羥基脯氨酸
應符合表23要求。


L-4-羥基異亮氨酸
應符合表24要求。


L-門冬氨酸
應符合表25要求。


L-胱氨酸
應符合表26要求。


L-鹽酸賴氨酸
應符合表27要求。


L-茶氨酸
應符合表28要求。


牛磺酸
應符合表29要求。


衛(wèi)生要求
應符合表30要求。


試驗方法
含量
按照附錄A規(guī)定的方法測定。

附錄A  (規(guī)范性附錄)
含量的測定

含量測定
L-異亮氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸1mL溶解后，加冰醋酸25mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于13.12mg的C₆H₁₃NO₂。
L-苯丙氨酸
取本品約0.13g，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于16.52mg的C₉H₁₁NO₂。
L-蘇氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸3mL使溶解，再加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于11.91mg的C₄H₉NO₃。
L-色氨酸
取本品約0.15g，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于20.42mg的C₁₁H₁₂N₂O₂。
L-酪氨酸
取本品約0.15g，精密稱定，加無水甲酸6mL溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當18.12mg 的C₉H₁₁NO₃。
L-脯氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加冰醋酸50mL使溶解，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于11.51mg的C₅H₉NO₂。
L-精氨酸
取本品約80mg，精密稱定，加無水甲酸3mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于8.710mg的C₆H₁₄N₄O₂。
L-絲氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸1mL溶解后，加冰醋酸25mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于10.51mg的C₃H₇NO₃。
L-醋酸賴氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸30mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于10.31mg的C₆H₁₄N₂O₂•C₂H₄O₂。
L-鹽酸精氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸3mL使溶解，加冰醋酸50mL，與CH₃COO)₂Hg試液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研細，加溫熱的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液應置棕色瓶內(nèi)，密閉保存)6mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于10.53mg的C₆H₁₄N₄O₂•HCl。
L-鹽酸鳥氨酸
取本品約0.10g，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加CH₃COO)₂Hg試液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研細，加溫熱的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液應置棕色瓶內(nèi)，密閉保存)5mL，加冰醋酸25mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于8.431mg的C₅H₁₂N₂O₂•HCl 。
L-甲硫氨酸
取本品約0.13g，精密稱定，加無水甲酸3mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于14.92mg的C₅H₁₁NO₂S。
L-組氨酸
取本品約0.15g，精密稱定，加無水甲酸2mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于15.52mg的C₆H₉N₃O₂。
L-丙氨酸
取本品約80mg，精密稱定，加無水甲酸2mL使溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于8.909mg的C₃H₇NO₂。
L-谷氨酰胺
取本品約0.12g，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于14.61mg的C₅H₁₀N₂O₃。
L-羥基脯氨酸
取本品約130mg，精密稱定，加無水甲酸3mL溶解后，加冰醋酸50mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于13.113mg的C₅H₉NO₃。
L-門冬氨酸
取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸5mL溶解后，加冰醋酸30mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于13.31mg的C₄H₇NO₄。
L-鹽酸賴氨酸
取本品約90mg，精密稱定，加無水甲酸3mL使溶解，加冰醋酸50mL與CH₃COO)₂Hg試液(取CH₃COO)₂Hg 5g，研細，加溫熱的冰醋酸使溶解成100mL，即得。本液應置棕色瓶內(nèi)，密閉保存)10mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于9.133mg的C₆H₁₄N₂O₂•HCl。
L-茶氨酸
取樣品約0.14g，精密稱定，置于150mL燒杯中，加入3mL無水甲酸，溶解后，再加50mL冰醋酸。加結(jié)晶紫指示液(取結(jié)晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得)1滴，將燒杯置電磁攪拌端上，浸入電極，攪拌，用0.1mol/L高氯酸標準液滴定，記錄電位。用坐標紙以電位(E )為縱坐標，以滴定液體積(V )為橫坐標，繪制E-V 曲線，以此曲線的陡然上升或下降部分的中心為滴定終點。同時進行空白試驗。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于L-茶氨酸17.12mg。
牛磺酸
取本品約0.2g，精密稱定，加水50mL溶解，精密加入中性甲醛溶液[取甲醛溶液，滴加酚酞指示劑(取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解，即得)5滴，用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至溶液顯微粉紅色]5mL，照電位滴定法，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1mL氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于12.52mg的C₂H₇NO₃S。

電位滴定法
電位滴定法: 將盛有供試品溶液的燒杯置電磁攪拌端上，浸入電極，攪拌，并自滴定管中分次滴加滴定液；開始時可每次加入較多的量， 攪拌，記錄電位；至近終點前，則應每次加入少量，攪拌，記錄電位；至突躍點已過，仍應繼續(xù)滴加幾次滴定液，并記錄電位。
滴定終點的確定分為作圖法和計算法兩種。作圖法是以指示電極的電位(E )為縱坐標，以滴定液體積(V )為橫坐標，繪制滴定曲線，以滴定曲線的陡然上升或下降部分的中點或曲線的拐點為滴定終點。根據(jù)實驗得到的E 值與相應的V 值，依次計算first derivative ?E /?V (相鄰兩次的電位差與相應滴定液體積差之比)和second derivative ?²E /?V²(相鄰?E /?V 值間的差與相應滴定液體積差之比)值，將測定值(E，V )和計算值列表。再將計算值ð?E /?V 或?²E /?V²作為縱坐標，以相應的滴定液體積(V )為橫坐標作圖，first derivative ?E /?V 的極值和second derivative ?²E /?V²等于零( 曲線過零)時對應的體積即為滴定終點。前者稱為一階導數(shù)法，終點時的滴定液體積也可由計算求得，即?E /?V 達極值時前、后兩個滴定液體積讀數(shù)的平均值；后者稱為二階一導數(shù)法，終點時的滴定液體和、也可采用曲線過零前、后兩點坐標的線性內(nèi)插法計算，計算公式見式(A.2):

式中:
V₀一一終點時的滴定液體積；
a  一一曲線過零前的second derivative絕對值；
b  一一曲線過零后的second derivative絕對值；
V  一一a 點對應的滴定液體積；
?V一一由a 點至b 點所滴加的滴定液體積。
由于二階導數(shù)計算法最準確，所以最為常用。
采用自動電位滴定儀可方便地在得滴定數(shù)據(jù)或滴定曲線。
如系供終點時指示劑色調(diào)的選擇或核對，可在滴定前加入指示劑，觀察終點前至終點后的顏色變化，以確定該品種在滴定終點時的指示劑顏色。


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